Choroby

Zastosowano zagnieżdżone techniki PCR w celu potwierdzenia wyników w próbkach zdefiniowanych jako mające niewykrywalne poziomy BCR-ABL. Standaryzacja wartości PCR
Aby porównać ilościowe wyniki PCR uzyskane przez trzy laboratoria, pierwotne wartości BCR-ABL obliczone jako procent BCR zostały przekształcone, aby odzwierciedlić zmniejszenie wartości przy użyciu znormalizowanej skali logarytmicznej (podstawa 10). Dokonano tego w każdym laboratorium, najpierw obliczając medianę 30 próbek pobranych od pacjentów z nowo zdiagnozowaną CML w fazie przewlekłej, którzy jeszcze nie rozpoczęli przyjmowania badanego leku (te same 30 próbek zostało przetestowanych w każdym laboratorium). Mediana wartości była używana jako standaryzowana linia podstawowa w każdym laboratorium. Zmniejszenie poziomów BCR-ABL ze znormalizowanej wartości linii bazowej obliczono dla każdej próbki. Na przykład, jeśli standaryzowana wartość linii bazowej w jednym środku wynosiła stosunek BCR-ABL: BCR wynoszący 36 procent, stosunek 0,036 procent reprezentował redukcję o 3 log od znormalizowanej wartości linii podstawowej. Nie było konieczności znajomości poziomu BCR-ABL pacjenta na linii podstawowej, aby obliczyć następną redukcję, ponieważ obliczenia oparto na standaryzowanej wartości linii podstawowej. Nie było żadnych statystycznie istotnych różnic między trzema laboratoriami po obliczeniu redukcji w stosunku do standardowego medianowego wstępnego traktowania BCR-ABL: BCR dla każdego laboratorium.
Jakość próbek
Transkrypty genu kontrolnego BCR odzwierciedlają stopień degradacji próbki. Aby ocenić jakość RNA w próbce, każde laboratorium określiło własny akceptowalny poziom transkryptów genów kontrolnych BCR i odrzuconych próbek o wartościach poniżej tego poziomu. Następujące kryteria zostały użyte do ustalenia, czy próbka ma niewykrywalny poziom transkryptów BCR-ABL: w próbce były wystarczające transkrypty BCR, aby zapewnić niższy limit czułości większy niż 4,5 log poniżej linii podstawowej, transkrypty BCR-ABL były niewykrywalne przez zagnieżdżoną PCR z odwrotną transkryptazą, a wyniki te zostały następnie potwierdzone w drugim laboratorium.
Analiza statystyczna
Częstości całkowitej remisji cytogenetycznej i redukcji z linii podstawowej w transkryptach BCR-ABL co najmniej 3 log porównywano między grupami przy użyciu dokładnego testu Fishera. Różnicę między grupami w zakresie zmniejszenia transkryptów BCR-ABL w pełnej lub po pełnej remisji cytogenetycznej oceniano za pomocą testu sumy rang Wilcoxona. Różnice między laboratoriami oceniano za pomocą testu Kruskala-Wallisa. Długoterminowe dane kliniczne od 128 pacjentów leczonych przez 12 miesięcy bez całkowitej remisji cytogenetycznej włączono do analizy czasu do progresji zgodnie z poziomem ich odpowiedzi po 12 miesiącach. Wśród pacjentów w grupie otrzymującej imatinib porównano czas do progresji między pacjentami, którzy nie mieli całkowitej remisji cytogenetycznej w ciągu 12 miesięcy, a tymi, którzy byli leczeni, z redukcją lub bez redukcji transkryptów BCR-ABL co najmniej 3 log, przy użyciu Metoda Kaplana-Meiera i różnica w poziomach odpowiedzi została oceniona przy użyciu testu log-rank. Progresję definiowano jako śmierć, rozwój CML po akceleracji lub CML o podłożu blastycznym, zwiększenie liczby białych krwinek lub utratę pełnej hematologicznej lub głównej odpowiedzi cytogenetycznej.26 Wyniki prognostyczne obliczono zgodnie ze sposobem Sokala i wsp. .28 i Hasford i wsp.29
Wyniki
Charakterystyka pacjentów
Tabela 1
[więcej w: dentysta z wieży, badania w 3 trymestrze ciąży, psychoterapia mokotów ]
[hasła pokrewne: opokan keto, toxo igg cena, dentysta z wieży ]