Indukowana przez gentamycynę korekcja funkcji CFTR u pacjentów z mukowiscydozą i mutacjami stopu CFTR ad

Sekwencja nukleotydowa otaczająca kodon terminacji odgrywa ważną rolę w określaniu skuteczności terminacji translacji.5-7 Antybiotyki aminoglikozydowe mogą zmniejszać wierność translacji, 8 głównie poprzez hamowanie korekty rybosomów, mechanizm wykluczający źle dopasowane przeniesienie aminoacylowe RNA zostaje włączone do łańcucha polipeptydowego.9 W ten sposób aminoglikozydy zwiększają częstotliwość błędnych insercji w kodonie nonsensownym i pozwalają na kontynuację translacji do końca genu, co wykazano w komórkach eukariotycznych, w tym 10 ludzkich fibroblastach.11 Podatność na hamowanie przez aminoglikozydy zależy od samego kodonu stop i od otaczających go sekwencji. Howard i in. wykazali, że dwie mutacje stopu związane z CFTR można stłumić, traktując komórki niskimi dawkami antybiotyku aminoglikozydowego12. Bedwell i in. wykazali, że po inkubacji linii komórkowej nabłonka oskrzeli IB3-1, która przenosi mutację W1282X CFTR, z aminoglikozydami, konduktancyjny przewodnictwo chlorkiem AMP (cAMP) i ekspresja funkcjonalnego CFTR zostały przywrócone do błony wierzchołkowej.13 Ostatnio Zsembery et al. wyizolował cholangiocyty z wątroby pacjenta z mutacją CFTR G542X i inkubował je z gentamycyną, co skutkowało ekspresją transportu z aktywowanym chlorkiem cAMP.14. Tak więc in vitro gentamycyna usunęła wpływ mutacji kodonu stop na transkrypcję i tłumaczenie CFTR. Efekt ten został następnie zademonstrowany w wielu modelach innych chorób wywołanych przez mutacje stop, w tym dystrofię mięśniową, 15 zespół Hurlera, 16 cystynozę, 17 późną infekcyjną neuronukleozę ceroidów, 18 i zaburzenia z udziałem genu p53.
W poprzednim otwartym badaniu pilotażowym stwierdziliśmy, że miejscowe stosowanie kropli gentamycyny do nosowego transportu zwiększonego chlorków w komórkach nabłonkowych dziewięciu pacjentów z mukowiscydozą, którzy mieli co najmniej jeden allel W1282X.20 Następnie, Clancy i wsp., 21 w otwartym W badaniu tym podawano gentamycynę dożylnie pięciu pacjentom, którzy byli heterozygotyczni pod kątem przerwania mutacji, i stwierdzili, że u czterech pacjentów wystąpiła hiperpolaryzacja różnicy potencjałów nosowych po podaniu izoproterenolu, co wskazuje, że transport chlorku był indukowany na powierzchni wierzchołkowej. W tych badaniach leczenie i pomiar wyników nie były maskowane.
Przeprowadziliśmy randomizowane, podwójnie ślepe, kontrolowane placebo, badanie krzyżowe w celu zbadania wpływu gentamycyny na funkcję CFTR w komórkach błony śluzowej nosa u pacjentów z mukowiscydozą i ustalenie, czy efekty są zależne od dawki.
Metody
Pacjenci i protokół badania
Rysunek 1. Rysunek 1. Liczba dni, w których zmierzono różnicę potencjałów nosa podczas czterotygodniowego okresu leczenia. Do badania kwalifikowały się pacjenci z mukowiscydozą, którzy mieli więcej niż 9 lat. U wszystkich pacjentów rozpoznano mukowiscydozę w oparciu o typowe objawy oddechowe i żołądkowo-jelitowe w obecności podwyższonego poziomu chlorków potu. Komisja ds. Etyki ludzkiej izraelskiego ministerstwa zdrowia zatwierdziła to badanie, a pisemną świadomą zgodę uzyskano od pacjentów lub ich rodziców
[podobne: dentysta z wieży, warszawa stomatologia, toxo igg cena ]
[hasła pokrewne: otręby ryżowe, ministerstwo zdrowia lista leków dla seniorów, prześwietlenie zębów ]